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液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。
根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀譜圖常見術(shù)語:
1、色譜曲線(romatogram):色譜柱流出物通過檢測器系統(tǒng)時所產(chǎn)生的響應(yīng)信號對時間或流動相流出體積的曲線圖,或者色譜圖通過適當(dāng)?shù)姆椒ㄓ^察到的紙色譜或薄層色譜斑點(diǎn)、譜帶的分布圖。
2、色譜峰(chromatographic peak):色譜柱流出組分通過檢測器系統(tǒng)時所產(chǎn)生的響應(yīng)信號的微分曲線。
3、峰底(peak base):峰的起點(diǎn)與終點(diǎn)之間的連接的直線。
4、峰高(h,peak height):色譜峰大值點(diǎn)到峰底的距離。
5、峰寬(W,peak width):在峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作切線與峰底相交兩點(diǎn)的距離。
6、半高峰寬(W h/2,peak withd at half height):通過峰高的中點(diǎn)作平行于峰底的直線,此直 線 與峰兩側(cè)相交兩點(diǎn)之間的距離
7、峰面積(A,peak area):峰與峰底之間的面積
8、拖尾峰(tailing peak):后沿較前沿平緩的不對稱的峰。
9、前伸峰(leading peak):前沿較后沿平緩的不對稱的峰(又叫伸舌峰、前延峰)。
10、假峰(ghost peak):除組分正常產(chǎn)生的色譜峰外,由于儀器條件的變化等原因而在譜圖上出現(xiàn)的色譜峰,即并非由試樣所產(chǎn)生的峰。這種色譜峰并不代表具體某一組分,容易給定性、定量帶來誤差(又叫鬼峰)。
11、畸峰(distrorted peak):形狀不對稱的色譜峰, 前伸峰、拖尾峰都屬于這類。
12、反峰(negative peak):也稱倒峰、負(fù)峰,即出峰的方向與通常的方向相反的色譜峰。
色譜峰常見問題解決方法